关于动物血清的一些常见问题解答

在细胞培养中，血清是zui的重要组成部分。实验操作中应注意及处理方法：

保存血清：建议保存血清-5。℃至-2O℃。但是，如果存放在4℃不要超过一个月。如果一次不能用完一瓶，建议您将血清无菌分装到合适的灭菌容器中，然后放回冷冻。

解冻血清的方法：建议你把血清从冰箱里取出来，先放在2~8℃冰箱使之融化，然后在室温下使之完全融化。但是，须注意的是，在融化过程中务必有规律地均匀摇晃。

血清解冻后发现絮状沉淀物出现，该怎么办？

血清中沉淀物的原因有很多，但zui的常见原因是血清中脂蛋白的变性，血纤维蛋白(凝血蛋白之一)在血清解冻后也存在于血清中，这也是沉淀物的主要原因之一。然而，这些絮状沉淀物不影响血清本身的质量。

如果你想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装在无菌离心管内，400g稍微离心一点，上清液可以加入培养基一起过滤。我们不建议你通过过滤来去除这些絮状沉淀物，因为它们可能会阻塞你的过滤膜。

为什麽要热灭活血清？

加热可以灭活补充系统。激活补充剂参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。建议在免疫学研究中使用热灭活血清，培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞。

有必要做热灭活吗？

实验表明，对于大多数细胞来说，正确处理后的热灭活血清是不必要的。经过这种处理的血清只能稍微促进细胞的生长，或者完全没有效果，甚至血清质量通常受到高温处理的影响，导致细胞生长速度降低。然而，经过热处理的血清会明显增加沉淀物的形成。这些沉淀物在倒置显微镜下观察，如“小黑点”，往往会让研究人员误以为血清受到污染，将血清放在37处℃在环境中，这种沉淀物会增加，使研究人员误以为是微生物的分裂扩增。

所以我们建议你，如果没有必要，你就不需要做热处理了。这样，不仅可以节省你宝贵的时间，还可以保证血清的质量！

为什麽存放在冰箱里的胎牛血清会出现沉淀？

胎儿血清未预老化，储存在2-8℃当时，血清中的各种蛋白质和脂蛋白(如凝聚素、纤维蛋白原、玻璃粘连蛋白等)可能会聚集，形成沉淀或可见的浑浊。这不应该影响血清质量。建议-20℃储存胎牛血清，避免反复冻融。

怎样避免产生沉淀物？

解冻血清时，请按照建议的逐步解冻方法(-20)℃至4℃在室温下)，如果血清解冻时温度变化过大(例如-20℃至37℃)，实验表明，沉淀物很容易产生。

解冻血清时，请随时摇匀，使温度和成分均匀，减少沉淀的发生。

不要把血清放在37℃太久。若在37℃放置时间过长，血清就会变得浑浊，血清中的许多不稳定成分也会受到损害，从而影响血清的质量。

血热灭活很容易导致沉淀物增多，如果没有必要，就不需要这样做了。

如果需要进行血清热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过长或摇晃不均匀，都会导致沉淀物增多。