动物血清厂家告诉您样本的用途

2022/11/28 10:53


动物血清:将收集在血清分离管中的全血标本放置在室温下.5-2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20分钟,取上清,或将上清除-20℃或-80℃但要避免反复冻融。

血浆:用EDTA或者肝素作为抗凝剂采集标本,采集后30分钟内2-8℃1000×g离心15分钟,取上清检测,或将上清放在-20℃或-80℃但要避免反复冻融。

组织匀浆:预冷PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(均匀浆液中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后切割组织。切割组织与相应体积PBS(一般按1:9的重量体积比,如1g组织样品对应9mL的PBS,可根据实验需要适当调整具体体积并做好记录。PBS加入蛋白酶抑制剂入蛋白酶抑制剂),在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,均匀浆可以超声破碎或反复冻融。最后,将均匀浆液加入5万×g离心5~10分钟,取上清检测,或将上清放在-20分钟℃或-80℃但要避免反复冻融。

细胞裂解液:吸弃培养液PBS(0.01M,pH7.4)再次清洗细胞。用细胞刮去细胞(胰酶和胰酶不能使用)EDTA处理),加2-5mLPBS(0.01M,pH7.4)。悬浮细胞可以省略。收集细胞悬液,4℃1000×g离心10min,弃去培养基,用预冷PBS润洗3次。加入适量的预冷PBS或非变性细胞裂解液(临用前添加蛋白酶抑制剂)重悬细胞,通常6孔板一孔的细胞量需要150-250μLPBS重悬。将样品放入-20℃或-80℃,冷冻样品,然后在室温下解冻样品,反复冷冻3次,使细胞完全分解,或超声破碎样品,以达到裂解的目的。℃10000×g离心10min,去除细胞碎片,取上清检测,或将上清放在-20℃或-80℃但要避免反复冻融。

上清细胞培养物或其他生物标本,请1万×g离心20分钟,取上清检测,或将上清放在-20℃或-80℃但要避免反复冻融。

样品的保存和稳定性:

样本在2-8℃72h,在-20℃或-80℃可储存6个月以上。样品收集后,不是一次检测,请按一次用量分装冷冻,避免反复冷冻。

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