胎牛血清的正确保存方式

2023/02/23 11:53

胎牛血清自上市以来一直存在争议。从制造商、价格、鉴定到产品质量,如何正确保存产品都是一些大问题。将带领您学习如何正确使用和保存血清。

标准血清的鉴别方法:

血清凝固沉淀的淡黄色透明液体,如从血管中提取血液,放入试管中,无抗凝剂,血液迅速凝固,形成冻结。凝血块收缩,周围沉淀的淡黄色透明液体为血清,凝血后也可通过离心获得。在凝血过程中,纤维蛋白原转化为维蛋白块,因此血清中没有纤维蛋白原,这与血浆不同。在凝血反应中,血小板释放出许多物质,凝血因子也发生了变化。这些成分留在血清中,并继续改变,如凝血酶原转化为凝血酶,随着血清储存时间的逐渐减少甚至消失。这些也是与血浆的区别。但大量不参与凝血反应的物质与血浆基本相同。为了避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析都以血清为样本。

牛血清作用:

胎牛血清是细胞培养中大量zui的天然培养基,富含细胞生长所需的营养物质,常用于动物细胞的体外培养,具有重要的功能。

血清保存要点:

1.需要长期保存的血清务必储存在-20℃-70℃的低温冰箱中。4℃冰箱的保存时间不得超过1个月。因为血清结冰时体积会增加10%左右,所以在冷冻在低温冰箱之前,血清务必保留一定的体积空间,否则容易污染或玻璃瓶冻裂。

2.热灭活是指56℃,30分钟加热完全解冻的血清,加热过程务必均匀摇晃,热处理的目的是灭活血清中的补充成分。除非必要,否则一般不建议进行这种热处理,因为热处理会导致血清沉淀显著增加,但也会影响血清的质量。补充剂的参与反应包括:细胞毒性、平滑肌细胞收缩、肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞的化学趋化和活化。

3.瓶装血清解冻应逐步解冻:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清在4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待完全溶解后重新包装。在溶解过程中,需要轻轻摇晃均匀(小心不要引起气泡),使温度和成分均匀,减少沉淀的发生。不要将血清从-20℃直接解冻到37℃,因为温度变化太大,容易导致蛋白质凝结和沉淀。

4.一般厂家提供的血清无菌,无需过滤消毒。如果发现血清有悬浮物,可以将血清加入培养液一起过滤,不要直接过滤血清。

5.血清中的沉淀物和絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性和解冻后血清中的纤维蛋白引起的,不会影响血清本身的质量。离心3000rpm可以在5分钟内去除,也可以不用处理。显微镜下的“小黑点”:经过热处理的血清,沉淀物的形成将显著增加。一些沉淀物在显微镜下被观察为“小黑点”,通常被误认为是血清污染。一般来说,这个小黑点不会影响细胞的生长,但如果怀疑血清的质量,应立即停止使用,以更换另一批血清。

6.不要把血清放在37℃太久,否则血清会变得浑浊,血清中的有效成分会破裂,影响血清质量的保存/运输:-5°C~-20°C。

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